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嚙齒類動物顯性致死試驗儀

一、 儀器介紹

實驗目的：

本試驗是一項生殖細胞致突變試驗,用來檢測受試物對整體哺乳動物生殖細胞的遺傳損傷,進一步確證體外試驗或其他試驗系統(tǒng)獲得的陽性結(jié)果,以評價受試物能否引起顯性致死突變。

實驗概述：

哺乳動物發(fā)育中的精子在物理或化學因素作用下,發(fā)生染色體損傷,從而使受精卵在發(fā)育中死亡引起顯性致死的染色體損傷主要為染色體斷裂。顯性致死的主要表現(xiàn)是受精卵著床前丟失或著床后胚

胎早期死亡。通過適當?shù)耐緩绞剐坌詣游锝佑|受試物,然后與未經(jīng)染毒且未交配過的雌性動物交配,交配結(jié)束后,取出雌性動物。雌性動物于妊娠后半期處死,剖開腹腔,取出子宮,檢査兩側(cè)子宮內(nèi)的胚胎植入數(shù)（著床數(shù)）、早死胎、晚死胎和活胎數(shù)。雄性動物每間隔一定時間再與另一批未經(jīng)染毒且未交配過的雌性動物交配,如此共進行數(shù)批,以保證覆蓋一個精子周期。

應用范圍

應用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域

符合標準：

GB/T 15670.18-2017《農(nóng)藥登記毒理學試驗方法第18 部分:嚙齒類動物顯性致死試驗》

二、試驗流程

1）實驗動物：

物種: 通常選用性成熟的健康雄性大鼠或小鼠（如SD大鼠、CD-1小鼠）

數(shù)量: 每組至少15只雄鼠，設(shè)多個劑量組和陰性/陽性對照組。

雌鼠: 需未交配過的健康雌鼠，用于與雄鼠交配。

2）給藥劑量分組:

至少設(shè)3個劑量組，高劑量應出現(xiàn)輕微毒性（如體重減輕）。

陰性對照組如體重減輕（溶劑對照）和陽性對照組（如環(huán)磷酰胺等已知致突變劑）

給藥方式:通常為經(jīng)口灌胃，連續(xù)給藥5~7天（覆蓋精子發(fā)生周期不同階段）

3）交配程序

交配安排:雄鼠給藥后，按周次與未處理雌鼠交配（每周更換一批雌鼠，共5~6批），以覆蓋精子發(fā)生全周期（精原細胞一精子）。

交配比例:通常1雄:2雌，每日檢查陰栓（交配證據(jù)）

4）觀察指標：

胚胎存活分析

雌鼠妊娠中期解剖，計數(shù)黃體數(shù)、著床數(shù)、活胎數(shù)和死胎數(shù)。

計算顯性致死率:

其他指標: 雄鼠體重、睪丸重量、精子質(zhì)量等,

5）結(jié)果評價：

陽性結(jié)果:顯性致死率顯著升高（如劑量依賴性增加，或某批交配周期異常），提示受試農(nóng)藥可能誘發(fā)生殖細胞遺傳損傷。

陰性結(jié)果:需結(jié)合其他遺傳毒性試驗綜合評估